无菌棉签开封后的有效期一般为4个小时左右，但是需要根据具体情况决定。

比如如果开封后的棉签，经过比较正规的无菌操作取出少许棉签后，剩下的还可以正常使用，而且只要无菌操作规范，有效期可以相对应的延长，有时甚至可以达到24小时的有效期。

但是如果无菌操作不规范，开封后剩下的棉签就被严重污染了，这时就已经失效了。

所以建议在使用无菌棉签时一定要注意无菌操作。